| 視野面積の計算 対物レンズの選択 クレンメルは使わない? プレパラートとは マッペ（トレイ） スライドボックス・スライドケース 標本整理箱（キャビネット） スタックランナー（移動書架） |
1. 顕微鏡
顕微鏡観察では，対物レンズ毎に，光の調節（強さ／明るさ，コンデンサー，絞り）を調節する必要があります．京大病理部で病理診断に 用いている光学顕微鏡 light microscope は ニコン Nikon 製かあるいはオリンパス Olympus 製ですが操作の原理は同じです．基本的な顕微鏡の使い方は，例えば下記のリンクなどを参照してください．
https://static3.olympus-lifescience.com/data/File/support/microscope-training-guide_CX31_202010.pptx?rev=2154
【接眼レンズ】
病理ってそんなにいいかげんだったのか，と思わせる文章です：An important change in this edition of the WHO Classification of Tumours series is the conversion of mitotic count from the traditional denominator of 10 high-power fields to a defined area expressed in mm2. This serves to standardize the true area over which mitoses are enumerated, because different microscopes have high-power fields of different sizes. This change will also be helpful for anyone reporting using digital systems.
視野の面積は，接眼レンズ eyepiece の視野数 field number に依存します．
| 視野の面積（mm^2) = π ×（[視野数÷対物レンズ倍率] ÷ 2）^2 |
乳癌のグレーディングで分裂像を数えるときは現在も10強拡視野 10 high power fields が用いられているため，視野数による補正が必要です．視野数22の場合，分裂像が ≤ 8は Score 1, 9–17は Score 2, ≥ 18は Score 3 となります． もし視野数25で計測する場合は，それぞれ ≤ 11, 12-22, ≥23 となります．
【対物レンズ】
病理組織診断のための顕微鏡では，対物レンズは乾式 (Oil の表示がないもの）でプラン・アポクロマート plan-apochromat が望まれます．倍率は 2x, 4x, 10x, 20x, 40x, 60x の6種類です．60x は dual color in situ hybridization (DISH) の観察と撮影に有用です．40倍以上の対物レンズでは補正環 correction collar 付きを選択することで鮮明な像が得られます．バーチャルスライドスキャナー slide scanner では，おそらく補正環のない20x 対物レンズと2倍の中間レンズの組み合わせを用いているため，高倍率画像は補正環付き対物レンズでの顕微鏡撮影画像より不鮮明な可能性があります．
Plan Apo レンズの例．側面に倍率／開口数の順で記載がある．水色帯は40倍，青色帯は60倍であることを示す．開口数は大きいほうがよいが，乾式では1を超えません（0.95）．Oil と記載があるレンズは病理診断時には使用しません．
【クレンメル】
クレンメル (slide clip) を用いるとプレパラートをステージに固定して観察できますが，欧米の病理医や京大の教員の多くはクレンメルを使用しません．
免疫染色との対比や高倍率での観察にはクレンメルの使用が望ましいと思われますが...
2. プレパラート
標準的なスライドガラス microscope slide, slide の大きさは約１インチ (25 mm) x ３インチ (75 mm) で厚さ約１ mm です．スライドガラスの上に観察する標本（厚さ 4 µm前後）を載せ，染色した後に封入剤 mounting medium を用いてカバーガラス cover slip (0.17 mm 厚) で覆ったものがプレパラートです．英語では単に slide と呼ぶことが多いと思われます．
スライドガラス，標本，封入剤，カバーガラス．
京大病院に導入されているHE標本自動作製装置 ベンタナHE600は脱パラフィン・HE染色・封入を自動で行いプレパラートを作製します．手作業に比べて作業の向上・染色性の安定・臨床検査技師の健康 リスクの低減に寄与すると期待されていますが，残念ながら封入時のトラブルがしばしばおこっています．
スライドガラスの価格は高いもので1枚約約30円（コーティングの種類で異なる）です．カバーガラスは1枚約約10円（大きさで異なる）です．封入剤の主成分はポリスチレンです．松浪硝子工業（1844年創業）は顕微鏡ガラス製品の製造販売を行う日本でもっとも古い顕微鏡関連企業の一つです．ニコン (1917年）やオリンパス（1919年）も100年以上の歴史があります．
3. マッペ
マッペ（スライドトレイ，microscope slide tray）は出来上がったプレパラートを観察しやすい状態で観察者の手元に置いておくために使用します．世間ではプラスチック製マッペが主流です．京大病 院では障子の ような素材で作られたマッペを主に使っています．ダンボール製のマッペ（紙マッペ，cardboard slide tray）は，標本に埃がつかない利点がありますが，中身が見えない欠点があります．京大病院では他施設で作製されたプレパラートを院内で作製された標本 と区別するために紙マッペを使用していま す．
マッペの価格は障子・段ボール製の場合1枚約700～800円くらいです．プラスチック製マッペはその半額くらいです．
4. スライドボックス・スライドケース
スライドボックス slide box は，20～100枚単位でプレパラートを運搬するのに使うための箱です．箱の材質はプラスチック，木材，紙（プレパラートを販売するときの包装）などです．プラスチックボックス製の箱の価格は数百円～数千円で意外と高価です．
スライドケース slide case は2～5枚のスライドを運搬するための半透明のプラスチックケースです．価格は1個100円未満です．
5. プレパラファイル microscope slide holder
ルーズリーフのページに相当する部分にプレパラートを保管できます．取り出してすぐに標本をみたい場合に便利です．京大病理部では主に肝移植標本の整理に使用していますが，そのために非常にスペースを占有しており管理が問題となっています．
6. 標本整理箱（スワン小型）
標本整理箱・標本キャビネット microscope slide cabinet, slide storage cabinet はスチール製で，プレパラートの長期保管に用います．プレパラート同士が重ならないように，引き出しの下にスプリングが敷かれています．
耐震のためにキャビ ネットを壁や天井に固定する必要があります．引き出しは地震時に標本が飛び出さないようにマグネットバーで固定しています（ミナトメディカル社製）．顕微 鏡スライドは1枚で約 5 g の重さがあります．年間10万枚を保管する場合は，500,000 g = 500 kg の重量に耐えられるスペースを毎年確保する必要があります．
7. スタックランナー
スタックランナー mobile shelving, rolling stack は図書館の移動書架と同じものです．スタックランナーを用いるとスペースを無駄なく活用して収納ができます．京大病院では，スタックランナーをパラフィン ブロック収納や臓器の一時保管場所に使用しています．プレパラートは比重2.5と重すぎるためスタックランナー収納には向きません．
スタックランナー
8. 切り出し・剖検関連
例えば，下記サイトに製品の説明があります．
https://www.sakuraus.com/Products.html/
https://zek-tech.co.jp/products/pathology.html
復習：
Q1. 英語でなんといいますか？
① 接眼レンズ，② プレパラート，③ マッペ，④ 標本整理箱，⑤ スタックランナー
Q2. 視野数22で対物レンズ40倍のとき視野の面積は約何mm2ですか
Q3. 標準的なプレパラートの大きさはどれくらいですか
© 2021 京都大学医学部附属病院 病理診断科・病理部